移液器使用中常见的问题及解决办法
移液器,用于移取少量液体,有20-200ul,200-1000ul,100-1000ul,还有1-10ml等各种规格的,在实验过程中可以大大提高自己的工作效率,既准确又快速,是实验室必备小设备。但是它的使用有很多的注意事项。
量程的调节
在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这时错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。
使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。
校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。
使用时要检查是否有漏液现象。方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下几方面:
3、如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体,然后再移液。
如果一支移液器能够同时具备可变容量或者固定容量,那就意味着在一把移液器中同时具备一个可变量程活塞和一个固定量程活塞。这意味着该品牌移液器在单支移液器的价格水平上为用户提供了两种功能。有的品牌的移液器的功能还不仅限于此,不仅每支移液器带有固定容量活塞,而且您还可以购买其它量程的固定活塞安装于移液器上,其价格远远低于购买一支固定量程移液器的价格。采用这个方法,您可以根据自己的需要选购固定量程移液器,经济且方便。
移液器与Tip头的结合能力是精确度和重现性的保证,一般来说移液器和Tip的结合都是采用直接卡口的形式,这种方法比较的牢固,但是在更换Tip头时需要比较使劲,久之对于移液器与Tip头的结合会产生不良的影响,有很大的可能会影响取样精度。有些品牌的移液器具备双层O型圈,这样可以保证加样时的误差小于设定误差的1%。O型密封圈使得结合更加精密,从而减小了不精确的误差。这种移液器大家在选购时,不妨做个参考,因为这种移液器能够适合更多的Tip头。
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